Если пара не может завести ребенка, на помощь приходит экстракорпоральное оплодотворение. Как создают эмбрионы в лаборатории и зачем их потом замораживают, рассказали журналистам региональных СМИ на специальной экскурсии в лаборатории ЭКО Коми республиканского перинатального центра.
Путь будущей мамы начинается в операционной лаборатории ЭКО, где проводится забор яйцеклеток у женщин после гормональной стимуляции. Яйцеклетки выращиваются в яичниках, и с помощью специальной иглы при трансвагинальной пункции их забирают под контролем УЗИ. Это безболезненная процедура, поскольку она производится под действием анестетиков, — рассказывает врач-эмбриолог Анна Попова. В день проходит по 2-3 пункции.
Затем яйцеклетки переносят в другую лабораторию через специальное окошко — это эмбриологическая лаборатория. Там полученную фолликулярную жидкость изучают под микроскопом.
Яйцеклетки помещают в чашку со специальной питательной средой и ставят их культивироваться в инкубаторы.
В настоящее время в лаборатории четыре инкубатора — они поддерживают температуру 37 градусов, влажность и 6% углекислого газа. "Создаем условия, максимально приближенные к тем, что существуют в организме женщины", — отмечает А. Попова.
Инкубаторы оснащены специальными дверцами, каждая из которых открывается отдельно, что позволяет сохранить баланс углекислого газа, влажности и температуры в инкубаторе с минимальными потерями и перепадами, чтобы яйцеклетки не погибли.
После получения яйцеклеток врач подготавливает сперму (мужской материал) для оплодотворения. Сперму обрабатывают в специальном инкубаторе.
Мужчины из специальной мужской комнаты передают материал в лабораторию через окошко вместе с соответствующими направлениями. Врач проводит обработку и подготовку материала, после чего можно приступать к оплодотворению.
Также врач может замораживать сперму. "Сейчас это популярная процедура. Многие мужчины не могут присутствовать на момент пункции фолликулов у жены: они участвуют в специальной военной операции, ездят в командировки, работают вахтовым методом или начинают курс химиотерапии. Например, при онкологическом заболевании необходимо сохранить биоматериал. Мы замораживаем биологический материал и храним его в специализированных криогенных сосудах Дьюара", — рассказывает врач-эмбриолог.
На фотографии — сосуды Дьюара, в которых содержится жидкий азот. В этих сосудах температура составляет −196 градусов. Установлены датчики утечки. Имеется и специальный сосуд Дьюара для пациентов с гемоконтактными инфекциями: ВИЧ-инфекцией, гепатитами.
"Эмбрионы, сперма могут храниться сколь угодно долго. Например, в мире есть случай, когда после 22-летнего хранения материала в жидком азоте родился ребенок - и он был здоровым", — отмечает врач.
Как же получаются эмбрионы? В день забора пункции и обработки спермы проводится оплодотворение: либо соединяется яйцеклетка и сперматозоид, либо сперматозоид специальной иглой вводится в яйцеклетку (при малом количестве или низком качестве сперматозоидов у мужчины). С помощью микроманипуляторов специальная игла обеспечивает точное введение — все "большие" движения становятся очень маленькими в пространстве, и одной иголочкой вводится сперматозоид в яйцеклетку.
Оплодотворение оценивается на следующий день — это наличие двух пронуклеусов (кружков) в яйцеклетке (на второй картинке). На второй день после оплодотворения уже можно наблюдать два бластомера — это клетки, которые образуются в результате дробления оплодотворенной яйцеклетки (зиготы).
"Для нас важно на пятые сутки получить такую бластоцисту. Здесь мы видим внутриклеточную массу — клетки, из которых образуется будущий плод, и клетки будущей плаценты - клетки трофобласта", — рассказывает врач-эмбриолог.
Врач-эмбриолог рассказал, что иногда при переносе замороженных эмбрионов их оболочка может немного утолщаться. По ее словам, на специальной установке выполняется вспомогательный хетчинг — с помощью лазера пробивают оболочку несколькими импульсами. Это помогает эмбриону вылупиться и лучше имплантироваться в полость матки, а также избавляет его от необходимости затрачивать дополнительные усилия на этот процесс. Врач отметила, что после вылупления эмбрион становится более липким и за счет этого надежно прикрепляется к эндометрию полости матки.
"Могу показать вам иглы, которыми проводится процедура ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида) — это введение одного сперматозоида в яйцеклетку. Процедура выполняется строго по показаниям при нарушениях сперматогенеза у мужчины, например, при патологиях сперматозоидов. Одна игла называется холдинг — она удерживает яйцеклетку, а вторая — инъектор, с помощью которого мы отбираем один сперматозоид и вводим его в яйцеклетку", - показывает врач.
Вся работа проводится под микроскопом. Берется специальная чашка, на которой есть микрокапельки, и в эти капельки помещаются яйцеклетки.
Эмбриолог микроиглой прокалывает мембрану яйцеклетки, вводит в нее сперматозоид и производит оплодотворение. Затем оплодотворенные яйцеклетки переносятся из чашки в питательную среду и возвращаются в инкубатор, где инкубируются необходимое время — желательно до пятых суток, до момента созревания бластоцисты.
"Бывают ситуации, когда мы культивируем эмбрионы шесть или семь суток, поскольку эмбрионы, как и люди, могут несколько отставать в развитии. Однако это не означает, что с ними что-то не так — они способны обеспечить здоровую беременность и рождение прекрасных детей", — рассказывает врач. Она отметила, что ИКСИ — это замечательная процедура, которая во всем мире позволила стать родителями парам, потерявшим всякую надежду на зачатие.
Сейчас в лаборатории хранится 59 образцов спермы. База постоянно обновляется: вчера было заморожено 8 новых доз, но некоторые израсходованы — происходит постоянное обновление запасов. Некоторые пациенты хранят донорские яйцеклетки для участия в программе ЭКО. Это необходимо в случаях, когда у женщин значительно снижен овариальный резерв, имеется генетическая предрасположенность к заболеваниям, либо они перенесли онкологические заболевания или химиотерапию.
Донором может стать женщина в возрасте до 35 лет, прошедшая полное медико-генетическое обследование. Это не просто случайный человек — донор должен соответствовать строгим критериям и обладать отличным состоянием здоровья.
"Мы также закупаем донорские сперматозоиды. Женщина самостоятельно выбирает донора по фенотипическим характеристикам: темные или светлые волосы, другие внешние признаки. К досье донора всегда прилагается его детская фотография, чтобы можно было примерно представить, как может выглядеть будущий ребенок", — рассказывает главный врач Коми республиканского перинатального центра Ольга Лебедева.
В настоящее время более 400 женщин хранят свои эмбрионы в ЭКО лаборатории. Эмбрионы хранятся на специальных носителях разного цвета — криопомпах. Эта технология широко применяется во всем мире.
"Процесс криоконсервации происходит следующим образом: все манипуляции выполняются в стерильных условиях. Колпачок снимается, и вы можете увидеть пластиковый носитель со стрелкой. На него наносится эмбрион, после чего быстро погружается в жидкий азот. Затем носитель герметично закрывается колпачком и не извлекается из азота до момента разморозки", - отмечает врач-репродуктолог.
При необходимости эмбрион быстро размораживается — риск повреждения при этом минимален.
"К сожалению, чаще всего пациенты обращаются к 40 годам, когда уже имеется длительное бесплодие. В течение 5–8 лет люди надеялись на естественное зачатие, откладывали обследование и лечение, не проводили необходимые исследования. Время уходит, и это существенно осложняет ситуацию", — отмечает специалист.
Женщинам после переноса замороженных эмбрионов в полость матки для наступления беременности выдаются носители, на которых указаны фамилия пациентки, дата заморозки и фотография эмбриона, информация о стадии и качестве эмбриона. Такой подход позволяет вовлечь пациентку в процесс и убедиться, что для переноса используется именно ее эмбрион и ее носитель был разморожен.
"Женщины часто плачут во время процедуры переноса, поскольку это эмоционально насыщенный момент, связанный с ожиданием", — отмечает специалист.
В завершении экскурсии врач-эмбриолог резюмировала, что все процессы в ЭКО-лаборатории Коми республиканского перинатального центра выполняются в соответствии с последними международными стандартами. И это учитывая, что генетика двигается вперед колоссальными шагами.
Напомним, что процедуру ЭКО делают и по ОМС, поэтому сейчас, если у пары год не наступает беременность, врачи проводят обследование и рассматривают ЭКО как один из потенциальных способов решения проблемы.
